本文目錄一覽

• 1，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的常用給藥方法包括哪些
• 2，如何通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)計(jì)算動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的用藥濃度
• 3，如何根據(jù)動(dòng)物給藥劑量推算細(xì)胞給藥劑量
• 4，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中如何確定是含藥血清給藥還是無(wú)血清給藥
• 5，怎樣由細(xì)胞實(shí)驗(yàn)IC50推算動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用藥劑量
• 6，舉例說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以用于生物制藥的哪些方面
• 7，關(guān)于細(xì)胞觀察實(shí)驗(yàn)的一些換算
• 8，如何決定細(xì)胞培養(yǎng)中的該細(xì)胞因子加入劑量
• 9，動(dòng)物試驗(yàn)給藥劑量怎么定
• 10，給藥劑量臨床常用量動(dòng)物等效面積系數(shù)培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度中培養(yǎng)

1，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的常用給藥方法包括哪些

腹腔注射 皮下注射 靜脈注射 灌胃

靜脈給藥，灌胃給藥，皮下給藥

2，如何通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)計(jì)算動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的用藥濃度

陽(yáng)性藥要看你的需要了，小鼠用藥劑量應(yīng)該按人鼠計(jì)量公式（人：70kg，臨床用量1mg)小鼠（20g）=1×0.0026×50＝0.13mg／kg換算下就可以了！一般都是以人的臨床最大劑量為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的低劑量，然后按(1:2)以此類推確定中劑量、高劑量

3，如何根據(jù)動(dòng)物給藥劑量推算細(xì)胞給藥劑量

1. 算出動(dòng)物體內(nèi)的藥物分布體積2. 算出濃度3. 濃度用于培養(yǎng)液

4，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中如何確定是含藥血清給藥還是無(wú)血清給藥

朋友你好！在含藥血清藥理作用強(qiáng)度與體內(nèi)給藥的量效關(guān)系研究、給體外實(shí)驗(yàn)體系中含藥血清加入量 的多少對(duì)藥理效應(yīng)藥理效應(yīng)觀察及對(duì)器官、組織、細(xì)胞的影響等為主.

5，怎樣由細(xì)胞實(shí)驗(yàn)IC50推算動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用藥劑量

IC50是半抑制率，意思是抑制率50%的時(shí)候藥物的濃度。把藥品稀釋成不同的濃度，然后計(jì)算各自的抑制率，以藥品的濃度為橫坐標(biāo)，抑制率為縱坐標(biāo)作圖，然后得到50%抑制率時(shí)候的藥品濃度，就是IC50。要點(diǎn)：藥品2倍稀釋，多做梯度，做點(diǎn)線圖即可!高保真生物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)整體外包服務(wù)~~

6，舉例說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以用于生物制藥的哪些方面

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是現(xiàn)代生物制藥的重要技術(shù)之一，不僅可以通過(guò)直接培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞制備相關(guān)藥用產(chǎn) 品，而且還可以作為宿主細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)原核細(xì)胞所不能生產(chǎn)的藥用物質(zhì)。許多人用和獸用的重要蛋白質(zhì) 藥物和疫苗，尤其是那些分子量較大、結(jié)構(gòu)較復(fù)雜或糖基化（glycosylated）的蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞 培養(yǎng)是首選的生產(chǎn)方式。

7，關(guān)于細(xì)胞觀察實(shí)驗(yàn)的一些換算

您好，現(xiàn)在這個(gè)行業(yè)發(fā)展的不錯(cuò)，生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)外包也會(huì)跟著發(fā)展，比如一些高?；蛘咂髽I(yè)部分實(shí)驗(yàn)不想自己內(nèi)部開(kāi)展，或者涉及的設(shè)備比較昂貴，技術(shù)要求高，都會(huì)尋求外包。但是現(xiàn)在競(jìng)爭(zhēng)也比較大，的得看單位這邊整體做的怎么樣。其次要看下你選擇單位的規(guī)模如何，上海這邊的，你可以看下基爾頓生物，原代細(xì)胞培養(yǎng)，動(dòng)物造模，整體課題外包。

IC50是半抑制率，意思是抑制率50%的時(shí)候藥物的濃度。把藥品稀釋成不同的濃度，然后計(jì)算各自的抑制率，以藥品的濃度為橫坐標(biāo)，抑制率為縱坐標(biāo)作圖，然后得到50%抑制率時(shí)候的藥品濃度，就是IC50。要點(diǎn)：藥品2倍稀釋，多做梯度，做點(diǎn)線圖即可!觀察一種藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的作用時(shí)，一個(gè)重要的問(wèn)題就是給動(dòng)物用多大的劑量較合適。劑量太小，作用不明顯，劑量太大，又可能引起動(dòng)物中毒致死。可以按下述方法確定劑量： 1. 先用少量小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量,然后用小于中毒量的劑量

8，如何決定細(xì)胞培養(yǎng)中的該細(xì)胞因子加入劑量

博凌科為解答：臨床用藥濃度和細(xì)胞培養(yǎng)的藥物干預(yù)濃度無(wú)法直接換算，有兩方面原因，一是臨床用藥劑量不等同于血藥濃度，即使是已知的血藥濃度，也不等同于作用于靶 器官/細(xì)胞的藥物濃度。二是體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)是藥物作用于孤立的細(xì)胞，而細(xì)胞在體內(nèi)要受到眾多因素和內(nèi)環(huán)境的影響，對(duì)藥物的敏感性會(huì)有很大的不同。所以你的問(wèn)題很難回答，常規(guī)的實(shí)驗(yàn)思路是這樣的：(1)體外實(shí)驗(yàn)，研究藥物對(duì)細(xì)胞是否有作用，如有作用，測(cè)出其量效關(guān)系和時(shí)效關(guān)系，進(jìn)一步研究其作用機(jī)理。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)之前，研究一下該藥物在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)，毒性等。(3)動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，研究藥物作用的有效劑量給藥方式，進(jìn)一步闡述其機(jī)理。(4)臨床實(shí)驗(yàn)。所以對(duì)于你的問(wèn)題，我的想法是，不必拘泥于同臨床用藥劑量一致性的問(wèn)題。以該藥物的血清濃度為標(biāo)尺(10-12iu/l)，上下呈10倍藥物濃度浮 動(dòng)，如0.001 iu/l、0.01 iu/l、0.1 iu/l、1 iu/l、10 iu/l、100 iu/l做一次六孔板實(shí)驗(yàn)，得到大致的有效濃度范圍后，按此道理再做一次六孔板實(shí)驗(yàn)(倍比關(guān)系)，就可以確定其作用的量效關(guān)系了。最后選定理想的作用劑量 研究其對(duì)細(xì)胞具體功能的影響和機(jī)制等。

胞外液也叫內(nèi)環(huán)境、腦脊液等:組織液(組織間隙液的簡(jiǎn)稱)，是多細(xì)胞動(dòng)物的細(xì)胞直接生活的體內(nèi)液體環(huán)境外界環(huán)境也叫外環(huán)境，是多細(xì)胞動(dòng)物個(gè)體生活的體外環(huán)境人體內(nèi)。占體液總量的三分之一，構(gòu)成了體內(nèi)細(xì)胞生活的液體環(huán)境.主要包括，存在于細(xì)胞外的體液叫做細(xì)胞外液(extracellular fluid ECF)。人體內(nèi)的細(xì)胞外液、血漿(血液的液體部分)和淋巴，這個(gè)液體環(huán)境叫做人體的內(nèi)環(huán)境

9，動(dòng)物試驗(yàn)給藥劑量怎么定

觀察一種藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的作用時(shí)，一個(gè)重要的問(wèn)題就是給動(dòng)物用多大的劑量較合適。劑量太小，作用不明顯，劑量太大，又可能引起動(dòng)物中毒致死?？梢园聪率龇椒ù_定劑量：1.先用少量小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量,然后用小于中毒量的劑量，或取致死量的若干分之一作為應(yīng)用劑量，一般可取1/10～1/5。2.植物藥粗制劑的劑量多按生藥折算。3.化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的已知藥物，特別是化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用都相似的劑量。4.確定劑量后，如第一次用藥的作用不明顯，動(dòng)物也沒(méi)有中毒的表現(xiàn),可以加大劑量再次實(shí)驗(yàn)。如出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，作用也明顯，則應(yīng)降低劑量再次實(shí)驗(yàn)。在一般情況下，在適宜的劑量范圍內(nèi)，藥物的作用常隨劑量的加大而增強(qiáng)。所以有條件時(shí)，最好同時(shí)用幾個(gè)劑量作實(shí)驗(yàn)，以便迅速獲得關(guān)于藥物作用的較完整的資料。如實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)劑量與作用強(qiáng)度之間毫無(wú)規(guī)律時(shí)，則更應(yīng)慎重分析。5.用大動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，防止動(dòng)物中毒死亡,開(kāi)始的劑量可采用鼠類的1/15～1/2,以后可根據(jù)動(dòng)物的反應(yīng)調(diào)整劑量。6.確定動(dòng)物給藥劑量時(shí)，要考慮給藥動(dòng)物的年齡大小和體質(zhì)強(qiáng)弱。一般說(shuō)確定的給藥劑量是指成年動(dòng)物的，如是幼齡動(dòng)物，劑量應(yīng)減小。如以狗為例：6個(gè)月以上的狗給藥劑量為1份時(shí)，3～6個(gè)月的給1/2份，45～89日的給1/4份，20～44日的給1/8份，10～19日的給1/16份。7.確定動(dòng)物給藥劑量時(shí)，要考慮因給藥途徑不同，所用劑量也不同。以口服量為100時(shí)，皮下注射量為30～50，肌肉注射量為20～30，靜脈注射量為25。二、人與動(dòng)物的用藥量換算方法人與動(dòng)物對(duì)同一藥物耐受性不同，一般動(dòng)物的耐受性要比人大，單位體重的用藥量動(dòng)物比人要高。必須將人的用藥量換算成動(dòng)物的用藥量。一般可按下列比例換算：人用藥量：1小鼠、大鼠：50～100兔、豚鼠：15～20狗、貓：5～10以上系按單位體重口服用藥量換算。如給藥途徑為靜脈、皮下、腹腔注射，換算比例應(yīng)適當(dāng)減小些。

ic50是半抑制率，意思是抑制率50%的時(shí)候藥物的濃度。把藥品稀釋成不同的濃度，然后計(jì)算各自的抑制率，以藥品的濃度為橫坐標(biāo)，抑制率為縱坐標(biāo)作圖，然后得到50%抑制率時(shí)候的藥品濃度，就是ic50。要點(diǎn)：藥品2倍稀釋，多做梯度，做點(diǎn)線圖即可!觀察一種藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的作用時(shí)，一個(gè)重要的問(wèn)題就是給動(dòng)物用多大的劑量較合適。劑量太小，作用不明顯，劑量太大，又可能引起動(dòng)物中毒致死?？梢园聪率龇椒ù_定劑量： 1. 先用少量小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量,然后用小于中毒量的劑量

10，給藥劑量臨床常用量動(dòng)物等效面積系數(shù)培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度中培養(yǎng)

有限稀釋法是一種常用的克隆方法。 將需要再克隆的細(xì)胞株自培養(yǎng)孔內(nèi)吸出并作細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)出1mL的細(xì)胞數(shù)。 用HT培養(yǎng)液稀釋， 使細(xì)胞濃度為50～60個(gè)/mL，于96孔培養(yǎng)板中每孔加0.1mL(五六個(gè)細(xì)胞/孔)。接種2排，剩余細(xì)胞懸液用HT培養(yǎng)液作倍比稀釋，再接種2排，如此類推，直至使每孔含0.5～1個(gè)細(xì)胞。培養(yǎng)7～10d后，選擇單個(gè)克隆生長(zhǎng)的陽(yáng)性孔再一次進(jìn)行克隆。一般需要如此重復(fù)3～5次，直至達(dá)100％陽(yáng)性孔率時(shí)即可，以確?？贵w由單個(gè)克隆所產(chǎn)生。例如： 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞克隆化培養(yǎng)技術(shù)—有限稀釋法一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1、掌握用有限稀釋法進(jìn)行細(xì)胞克隆化培養(yǎng)技術(shù)； 2、學(xué)會(huì)細(xì)胞克隆形成的辯觀察技能； 3、配合抗體分泌細(xì)胞篩選技術(shù)，確定抗體分泌細(xì)胞。 二、實(shí)驗(yàn)原理： 克隆化培養(yǎng)即單細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，用有限稀釋法進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)，可以及時(shí)確定陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株，同時(shí)淘汰因發(fā)生染色體丟失或抗體的輕、重鏈基因分離而出現(xiàn)無(wú)抗體分泌陰性細(xì)胞株。 一般雜交瘤細(xì)胞需經(jīng)過(guò)52—3次反復(fù)克隆后，才能達(dá)到100%細(xì)胞陽(yáng)性率。 該辦法亦適用于一般細(xì)胞培養(yǎng)中的細(xì)胞純化、突變細(xì)胞株的選擇，識(shí)別和分離。是細(xì)胞株的常用方法。 三、實(shí)驗(yàn)材料： 雜交瘤細(xì)胞、25毫升培養(yǎng)瓶、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板（天津有機(jī)玻璃廠）、移液管（1毫升、5毫升、10毫升）、彎頭滴管、倒置顯微鏡、CO2培養(yǎng)箱、白細(xì)胞計(jì)數(shù)板、計(jì)數(shù)器、蓋玻片、防水筆、RPMI-1640、小牛血清、青鏈霉素、10毫升刻度離心管，00橡膠塞，飼養(yǎng)細(xì)胞（3-6×105/ml、見(jiàn)腹腔細(xì)胞的制備）。 四、實(shí)驗(yàn)步驟： 1、分裝了每孔0.1毫升腹腔細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板（可提前24小時(shí)準(zhǔn)備就緒，置CO2培養(yǎng)箱中備用）； 2、自細(xì)胞培養(yǎng)瓶中收集長(zhǎng)勢(shì)良好的雜交瘤細(xì)胞（亦可自24孔培養(yǎng)板孔中收集），制成懸液。3、按白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法準(zhǔn)確計(jì)得細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)，一般在105/毫升左右。 4、取3支10毫升刻度離心管排列在超凈工作臺(tái)試管架上，先用無(wú)血清培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋至103/毫升，再用含15%小牛血清的完全培養(yǎng)基稀釋到101/毫升細(xì)胞，即每0.1毫升1個(gè)細(xì)胞。 5、每孔0.1毫升細(xì)胞懸液。 6、置37℃5%CO2培養(yǎng)箱，4天后取出觀察，并在板蓋上打上標(biāo)記，做好記錄并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。 7、繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)，則在第4-5天更換1/2培養(yǎng)基，約第7-9天可以收獲培養(yǎng)液上清用于檢測(cè)抗體。并重復(fù)檢測(cè)1-2次。 8、選擇單克隆生長(zhǎng)孔，生長(zhǎng)良好，陽(yáng)性強(qiáng)者，轉(zhuǎn)移到24孔板再做克隆經(jīng)培養(yǎng)或擴(kuò)大培養(yǎng)。 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以總細(xì)胞孔（如96孔）中出現(xiàn)克隆孔統(tǒng)計(jì)出克隆百分率，并可進(jìn)一步按單細(xì)胞孔、雙細(xì)胞孔、多細(xì)胞孔分別計(jì)算出百分率。 六、注意事項(xiàng)： 1、注意無(wú)菌操作，一旦發(fā)現(xiàn)污染（孔）必須及時(shí)處理； 2、計(jì)數(shù)細(xì)胞要求準(zhǔn)確，稀釋量亦要準(zhǔn)確，否則將造成一孔多細(xì)胞克隆或克隆百分離太低； 3、在計(jì)數(shù)克隆出現(xiàn)率之前，不宜更換培養(yǎng)液，也不宜強(qiáng)烈振動(dòng)培養(yǎng)板； 4、做克隆化培養(yǎng)的小牛血清必須是優(yōu)質(zhì)血清； 5、若做克隆抗體檢測(cè)時(shí)，特別要保護(hù)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況，防止細(xì)胞生長(zhǎng)不良甚至丟失。 七、說(shuō)明： 哺乳動(dòng)物細(xì)胞通過(guò)分離、稀釋接種，培養(yǎng)在適宜于單細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)液中，形成細(xì)胞克隆。運(yùn)用這項(xiàng)技術(shù)可以制作細(xì)胞成活曲線，即在接種相同數(shù)量細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中，加入不同濃度的化學(xué)藥品，或照以不同劑量的射線，觀察其對(duì)細(xì)胞的聽(tīng)見(jiàn)害程度。由此可以在哺乳類細(xì)胞中進(jìn)行誘變?cè)囼?yàn)及分離突變細(xì)胞。

雖然我很聰明，但這么說(shuō)真的難到我了

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